Anti-idiotype guinea pig antibodies as response to insulin immunization

The study was done using 39 guinea pigs grouped as followed: 18 were with 0.5 mg of porcine insulin emulsified in complete Freund´s adjuvant; 12 were injected with saline and 9 were as control of cardiac bleeding during the assay. Intraperitoneal glucose tolerance tests (IGTT) were carried out on days 0, 11,32 and 38. Seven of the thirteen guinea pigs immunized with insulin which survived after the study, showed glucose intolerance on day 32 at 90 and 120 min (p<0.01 and p<0.001) and on day 38 at 120 min (p<0.05). Anti-idiotypic IgG partially purified from a sera pool from these animals inhibited (125-)Insulin binding to rat hepatocytes, immunoprecipitated (125)I-rat insulin receptors and recognized the alpha-subunit of insulin receptor in immunobloting. We conclude that insulin anti-idiotypes in guinea pigs offer a simple way to produce antibodies against insulin receptor binding site. The methodology for anti-idiotype identification can be applied to patients with insulin resistance.

Non enzymatic liver cells isolation: citrate-perchlorate technique

In the present study we describe a non-enzymatic technique for the isolation of rat hepatocytes by perfusion of liver through portal vein. The perfusion media consist of 1 mM sodium percholorate. 5 mM sodium citrate, 10 mM glucose, 129 mM NaCl and 0.1 per cent bovine-serum albumin at pH 7.4. After purification through diatrizoate gradient, electron microscopical studies revealed that most of purified hepatocytes were well preserved and presented a normal ultrastructure, thus correlating with previous biochemical results. The present method enables the recovery of metabolically and morphologically normal hepatocytes.

Tratamiento quirúrgico de la hipoglucemia hipersulínica persistente en pediatría / Surgical treatment in persistent hyperinsulemic hypoglucemia

Entre 1989 y 1994, 7 pacientes fueron tratados con pancreatectomía subtotal por hipoglucemia hiperinsulinémica persistente.Los pacientes que presentaron sintomatologá en la primera semana de vida, sufrieron formas más graves y requirieron ser operados con urgencia, mientras que aquellos con presentación tardía, pudieron ser controlados sin cirugía hasta edades mayores (13 meses,16 años, 19 años). en todos se realizó tratamiento médico y se indicó la intervención quirúrgica por hipoglucemia intratable o signos neurológicos evolutivos.La resección del 90-95 por ciento del páncreas resultó un tratamiento efectivo para la hipoglucemia por hiperinsulinemia. De los pacientes operados, sólo dos presentaron secuelas adjudicables a la intervención.Un paciente necesitó resección total luego de dos reintervenciones porque presentaba lesiones de nesidioblastosis predominantemente en la región cefálica del páncreas.El otro presentó una pancreatitis y fístula pancreática, que curó con tratamiento médico.Todos los niños presentaron hiperplasia de los islotes de Langerhans, en algunos casos difusa y en otros localizada, indetectables en el acto quirúrgico. Parece evidente que cuando áreas de hiperplasia persisten en el páncreas remanente, pueden determinar la persistencia de la enfermedad.

La relación insulina/glucagon en la remisión diabética espontánea / Insulin/glucagon relationship in spontaneous diabetic remission

Definimos como "remisión diabética" la suspensión del tratamiento insulínico por un período mayor de 15 días, luego de la normalización de as glucemias y desaparición de las glucosurias. Hemos estudiado 21 niños diabéticos insulino-dependientes en el período de remisión (10 niños y 11 niñas) y 29 niños normales como control. Dos clases de pruebas fueron realizadas: glucosa intravenosa (GEV) y glucosa post-tolbutamida (GPT). Se separaron dos grupos en los niños que efectuaron la prueba de GEV. En uno se dosó glucosa, insulina, somatotrofina y glucagon plasmáticos y en el otro se determinó glucosa y péptido-C. La glucemia fue menor en los normales que en los niños en remisión. La desaparicióon de la glucosa (constante "K") fue máas alta en los normales (p < 0,001) indicando claramente el hipoinsulinismo hallado. La secreción de insulina lluego de ;a glucosa EV fue muy baja en el grupo en remisión, no pasando del valor basal. Solo dos niñas mostraron un valor normal o alto luego de la sobrecarga de glucosa y una de ellas en uns egundo estudio mostró el hipoinsulinismo común del grupo diabético en remisión. La cinética de la secreción de glucagon y somatotrofina en elg rupo en remisión fue normal, pero los niveles de glucagon fueron bajos. Cuando el área integrada (0-120 min) fue determinada para la insulina, somatotrofina y glucagon, se observó que la insulina y el glucagon eran bajos en relación a los normales (p < 0,05) y la somatotrofina igual. Sin embargo , la relación insulina/glucagon fue similar en ambos grupos. El péptido-C en la prueba de GEV mostró en los niños en remisión un valor menor que en el grupo normal semejando el comportamiento del otro grupo en remisión en donde se dosó la insulina. Durante la prueba de glucosa psot-tolbutamida, el grupo normal respondió con un pico de secreción de insulina en cada estímulo, siendo mayor la respuesta a la glucosa post-tolbutamida. En el grupo en remisión, la glucemia fue más elevada que en el grupo normal y la secreción de insulina no sobrepasó el nivel basal luego de los estímulos. La secreción de la somatotrofina en la fase de glucosa fue mas baja que en los normales y el glucagon fue consistentemente menor en este grupo. Podemos concluir que los niños en remisión no presentan una velocidad de desaparición de glucosa normal, coincidente con un marcado hipoinsulinismo. El glucagon es proporcionalmente tan bajo como la secreción de insulina, lo que permite que el índice insulina/glucagon sea similar en lo

Nefropatia diabetica en niños: estudio mediante el dosage de albumina urinaria / Diabetic nephropathy in children: study of urinary albumin excretion rate

Se estudiaron los niveles de excreción de albúmina urinaria (EAU) y su relación con el tiempo de evolución de la enfermedad en niños con Diabetes Tipo I seleccionados de la población que concurre a los Consultorios de Endocrinología, independientemente del grado de control o régimen insulínico. Se recolectaron muestras ( en tiempos cortos, con sobrecarga hídrica) en 39 niños: 30 pacientes y 9 controles, sin patología renal demostable por métodos habituales y con tensión arterial normal. Los pacientes fueron divididos según los años de evolución de su diabetes en: Grupo I: menos de 5; Grupo II: 5 a 10 y Grupo III: más de 10 años. Todos se hallaban fuera del período de remisión. Para los dosajes se desarrolló un RIE de doble anticuerpo. Los resultados (XñDS), expresados en microng/min/1,73 m2, fueron: GC (grupo control) (n = 9) 4,30 ñ 2,53; GI(n = 12) 10,44 ñ 9,47; GII (n = 10) 8,03 ñ 7,27 y GIII (n + 8) 8,56 ñ 4,26. Para definir EAU elevada (microalbuminuria) se consideró como límite 12 microng/min/1,73 m2, que corresponde a la media más 3 DS del GC. Así se halló un 16,6, 40 y 12,5% de niños con mciroalbuminuria en los grupos I, II y III, respectivamente. si dividió luego el total de pacientes (m = 30) en 2 grupos: con EAU normal (< 12 microng/min/1,73m2) y com microalbuminuria (EAU) > 12 microng/min/1,73m2). El primer grupo comprendió 23 pacientes (76,6%) con una EAU de 5,96 ñ 3,97 microng/min/1,73m2; el grupo con mciroalbuminuria comprendió 7 pacientes (27,3%) con una media de 19,63 ñ 6,98 microng/min/1,73 m2. Estas diferencias son estadísticamente significativas (p < 0.001) mientras que glucemia, glucosuria, filtrado glomerular y volumen unrinario medidos durante la prueba no mostraron diferencias significativas. La técnica de recolección utilizada presenta valores de EUA semejante a los hallados con otros procedimientos. La población separada a partir de esta cifra es porcentualmente similar a la hallada por otros autores en pacientes diabéticos con microalbuminuria